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細胞簡介：

扁桃體是一對扁卵圓形的器官，位于扁桃體窩內。按其位置分別稱為腭扁桃體、咽扁桃體和舌扁桃體。其中，腭扁桃體大，通常所說的扁桃體即為腭扁桃體。

腭扁桃體我為多源性血供器官，主要的營養(yǎng)動脈分別為腭升動脈、面動脈和咽升動脈。動脈內皮組成了動脈內壁，并持續(xù)受到血流剪切力的影響。內皮細胞在切應力的作用下，分泌不同的內皮因子并進而影響血管收縮和生長。

細胞特性：

1）細胞來源于人正常扁桃體組織。

2)細胞鑒定：vWF熒光染色為陽性。

3)經鑒定細胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細胞生長方式：上皮樣，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代內皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發(fā)生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品：

人基質金屬蛋白酶-3（MMP-3）elisa檢測試劑盒

整合素和生長因子樣蛋白1抗體

LIMS1

信號轉導蛋白9復合體7b抗體

CSN7b

磷酸化D激酶衰減蛋白1抗體  Anti-phospho-DOK1 (Ser450)

核糖體S6激酶RSK2抗體  Anti-Rsk2/MAPKAP Kinase 1b

9號染色體開放閱讀框156抗體  Anti-C9orf156

鋅指蛋白Zdhhc12抗體  Anti-ZDHHC-12

諾里病NDP蛋白/早產兒視網膜病蛋白抗體

NORRIN

通用轉錄因子2H亞基4/TFIIH p52抗體

GTF2H4

酪蛋白硫酸轉移酶2抗體  Anti-TPST2

磷酸化磷酯酶Cβ3抗體  Anti-Phospho-PLC beta3 (Ser1105)

蛋白磷酸酶2C亞型α抗體  Anti-PP2CA/PPM1A

單鏈DNA結合蛋白相互作用蛋白1  Anti-SOSSC/C9orf80

磷酸化Ephrin B抗體

phospho-Ephrin B (Tyr329)

嗅覺受體5AU17抗體

OR5B17

信號傳導抑制蛋白WD重復蛋白2抗體  Anti-WSB2/WD SOCS box protein 2

核孔蛋白NUP160抗體  Anti-NUP160

腎素結合蛋白抗體  Anti-RENBP

磷酸鈉協轉運蛋白抗體  Anti-SLC34A2

大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)elisa分析檢測試劑盒

鉀通道四聚體結構域蛋白11抗體

KCTD11

芳香基硫酸酯酶F抗體

人扁桃體動脈內皮細胞ARSF