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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人外周血單核細胞

英文名稱：Human Peripheral Blood Monocyte Cells

組織來源：外周血

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

人外周血單核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞，并在骨髓中發(fā)育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較，單核細胞內含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細胞體積繼續(xù)增大，直徑可達50-80μm，細胞內所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素，參與機體防衛(wèi)機制，還產(chǎn)生一些能促進內皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂，并包圍異物。

公司實驗室分離的人外周血單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人外周血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 半貼壁半懸浮

細胞形態(tài) 圓形、巨噬細胞樣

傳代特性 不增殖；不傳代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠表皮生長因子(EGF)檢測試劑盒 ，英文名： EGF ELISA Kit

Mouse beta 2 glycoprotein aibody IgA/G/M (1 beta 2-GP1 IgA/G/M) ELISA Kit 小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)檢測試劑盒

ELISA 小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF)  進口分裝

CLIAKitforKGF(HumanKeratinocyteGrowthFactor)ELISAKit人角化細胞生長因子

通用型蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次

MHCⅠ/H-1Ⅰ大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類

PTPN1重組人 PTP1B / PTPN1 蛋白 Protein

細胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)重組蛋白 Recombinant Programmed Cell Death Protein 6 Interacting Protein (PDCD6IP)

OSM重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

GPC3 Protein Human 重組人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白

HA Protein H7N7 重組甲型流感 H7N7 (A/chicken/Nlands/1/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

細胞程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)重組蛋白 Recombinant Programmed Cell Death Protein 6 Interacting Protein (PDCD6IP)

GPC3 Protein Human 重組人 Glypican 3 / GPC3 / OCI-5 蛋白

PTPN1重組人 PTP1B / PTPN1 蛋白 Protein

HA Protein H7N7 重組甲型流感 H7N7 (A/chicken/Nlands/1/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

OSM重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human microtubule associated protein 2 (MAP-2) ELISA Kit 人微管相關蛋白2(MAP-2)檢測試劑盒

HumanCTX-2ELISAKit 人骨退化特異標志物(CTX-2)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCCAAT/enhancerbindingproteinalpha,C/EBPα檢測試劑盒人CCAAT增強子結合蛋白α(C/EBPα)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉基因玉米Bt11品系試劑盒20次

HumanSH2-coainingprotein,SHC/SLP-76ELISAKit人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

人外周血單核細胞兔子白介素1β(IL-1β)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子白介素10(IL-10)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子白介素1(IL-1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用