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細胞簡介：

兔腎上腺皮質(zhì)分離自腎上腺組織；腎上腺是機體相當重要的內(nèi)分泌器官，由于位于兩側(cè)腎臟的上方，故名腎上腺。腎上腺左右各一，位于腎的上方，共同為腎筋膜和脂肪組織所包裹。左腎上腺呈半月形，右腎上腺為三角形。從側(cè)面觀察，腺體分腎上腺皮質(zhì)和腎上腺髓質(zhì)兩部分，周圍部分是皮質(zhì)，內(nèi)部是髓質(zhì)。腎上腺內(nèi)部是髓質(zhì)部分，分泌腎上腺素和。這些激素在應激狀態(tài)釋放增多，能夠幫助升高血壓，加快心率，升高血糖，動員全身的儲備物質(zhì)，為機體與外界環(huán)境的抗爭作好充分準備。腎上腺外部是皮質(zhì)部分，分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能夠促進小便中尿鉀的排出和尿鈉的重吸收，正常數(shù)量的醛固酮，對維持機體正常血壓有重要作用。但是如果過多分泌，會導致高血壓和低血鉀。是機體必需的激素之一。當機體處于應激狀態(tài)時，比如感冒，發(fā)燒，遇到突發(fā)事件的時候，腎上腺皮質(zhì)分泌大量的，這些能夠動員機體的存儲能源，為應對內(nèi)部或者外部重要事件提供充分的物質(zhì)準備。當缺乏時，機體在遇到重大事件的時候，往往缺乏足夠應對能力，容易被病毒或外界壓力所擊倒。腎上腺產(chǎn)生的雄激素，對雄性來講，并非，但是對雌性而言，是雄激素的一個重要來源。

方法簡介：

實驗室分離的兔腎上腺皮質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的兔腎上腺皮質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔腎上腺皮質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子結(jié)合蛋白4試劑盒   兔子結(jié)合蛋白4試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子結(jié)合蛋白4試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子結(jié)合蛋白4試劑盒、兔子結(jié)合蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子透明質(zhì)酸試劑盒   兔子透明質(zhì)酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子透明質(zhì)酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人血管緊張素原試劑盒   人血管緊張素原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人血管緊張素原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人血管緊張素原試劑盒、人血管緊張素原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)試劑盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG試劑盒人菌抗體IgG(BrucellaAbIgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

NFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB 0.5mgNFKBp65(p65 NF-kappa B;p65NFKB) 細胞核因子或稱k基因結(jié)合核因子(多肽抗原)

GALE Protein Human 重組人 GALE / UDP galactose-4-epimerase 蛋白

IL10重組貓 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein

S100A8 Protein Mouse 重組小鼠 S100A8 / CAGA 蛋白

TWF1重組人 TWF1 / PTK9 / Twinfilin-1 蛋白 Protein

兔腎上腺皮質(zhì)細胞大鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

Mouse ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒

MousephosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit 小鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanPancreaticPolypeptide,PPELISAKit人胰多肽

同位素標記放射活性離心柱試劑盒20次

ELISAKitpERK大鼠0酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。