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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠皮膚肥大細(xì)胞

英文名稱：Mouse Skin Mast Cells

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠皮膚肥大分離自皮膚組織；皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)（T細(xì)胞、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化）。皮膚肥大細(xì)胞表達(dá)MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達(dá)大量的IgE-Fc受體，釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣，具有強(qiáng)嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì)，可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)（炎癥）。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸，使細(xì)胞多陷于崩壞。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個(gè)分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠皮膚肥大經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 懸浮

細(xì)胞形態(tài) 圓形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： NOX1 ELISA Kit

Mouse platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)檢測(cè)試劑盒

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 大鼠IX(FIX)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGM(HumanGasicMucin)ELISAKit人胃粘液素

細(xì)胞繁殖與毒性高通量篩選熒光檢測(cè)試劑盒500次

RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (抗原)

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor 0.5mgFGF-7/KGF (Keratinocyte growth factor precursor) 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (抗原)

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)

REG3A重組大鼠 REG3A 蛋白 Protein

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白

FCGRT & B2M重組人 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白 Protein

小鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human Glucose depende insulin releasing polypeptide (GIP) ELISA Kit 人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)檢測(cè)試劑盒

Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISAKit 人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43(GAP-43)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanactivatinganscriptionfactor-1,ATF-1檢測(cè)試劑盒人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)過氧化物反式十八碳四烯酸(cis-parinaricacid)高效液相色譜(HPLC)分析試劑盒20次

MouseAngiopoietin4,ANG-4ELISAKit小鼠血管生成素4(ANG-4)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠皮膚肥大細(xì)胞小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-1(mouse MIP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-2(mouse MIP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-3a(mouse MIP-3a)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠巨嗜細(xì)胞性蛋白-3β(mouse MIP-3β)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用